DNA聚合酶（DNA Polymerase，EC编号2.7.7.7）是一种参与DNA复制的酶。它主要是以模板的形式，催化去氧核糖核苷酸的聚合。聚合后的分子将会组成模板链并再进一步参与配对。

DNA聚合酶以去氧核苷酸三磷酸（dATP、dCTP、dGTP、或dTTP，四者统称dNTPs）为底物，沿模板的3'→5'方向，将对应的去氧核苷酸连接到新生DNA链的3'端，使新生链沿5'→3'方向延长。新链与原有的模板链串行互补，亦与模板链的原配对链串行一致。

已知的所有DNA聚合酶均以5'→3'方向合成DNA，且均不能「重新」（de novo）合成DNA，而只能将去氧核苷酸加到已有的RNA或DNA的3'端羟基上。因此，DNA聚合酶除了需要模板做为串行指导，也必需引物来起始合成。合成引物的酶叫做引发酶。

In molecular biology, DNA polymerases are enzymes that synthesize DNA molecules from deoxyribonucleotides, the building blocks of DNA. These enzymes are essential to DNA replication and usually work in pairs to create two identical DNA strands from a single original DNA molecule. During this process, DNA polymerase “reads” the existing DNA strands to create two new strands that match the existing ones.